| Nyelv : |
|
| Enciklopédia közösség |Enciklopédia válaszok |Küldje el kérdését |Szókincs |Feltöltés ismeretek |
Polimeráz láncreakció |
 |
|
b. kemencében melegítjük agaróz teljesen fel nem oldódik, majd adjunk hozzá desztillált vizet, hogy az eredeti súly egyensúlyt; c. végén a gél lap, hogy lezárjuk a rendszert, helyezze be a megfelelő fésű, az oldott agaróz (50 ℃), mely egészen a vastagsága 4 ~ 6 mm (buborék vegye ki a légbuborékok ), a hűtés és megszilárdulási szobahőmérsékleten (körülbelül 30 ~ 45 perc);d. gyártása műanyag lapot helyezni a elektroforézis tartály, óvatosan húzza a fésű egyenesen, hogy a kutak ép. (2) pecsételő a. és 2,0 μ l brómfenolkék adtunk a PCR-terméket, majd egy kis centrifugális; b. minden lyukat pecsételő 10,0 μ l, kék pöttyös minta keverék süllyedni lyuk alján. (3) Elektroforézis Kapcsolja ki a hálózati kapcsolót, állítsa a feszültség 3 ~ 5 V / cm (kb. 100 V), látható a brómfenolkéket csíkos negatívról a pozitív mozgás figyelhető meg körülbelül egy óra. (4) festése Jó gélt tartalmazó vizes oldat EB, 15-20 percig festettük. (5) A megfigyelt A gélelektroforézis jó UV-detektor átviteli elhelyezett megfigyelő viseljen fedelét, ne kapcsolja az UV lámpa, akkor láthatjuk, narancs-vörös csíkos szerinti nukleinsav szalag vastagsága, lehet becsülik, hogy a minta DNS-koncentráció. Ha mind a standard, ismert molekulatömegű DNS-t elektroforézisnek vetjük alá, a DNS-csíkokat lehet a lineáris becslés kezdeti relatív helyzete a minta molekulatömeg. (6) óvintézkedések a. forró ragasztó, a ragasztó mennyisége nem haladhatja meg a lombikot kapacitása 1/3, vagy könnyen túlcsordulás. b. főtt ragasztó kell hűteni 50 ℃, vagy úgy, majd öntsük elkerülése érdekében alakváltozás a műanyag lemez rendszer, és csökkenti annak az esélyét, szivárgás ragasztó. c. öntsük ragasztó Megjegyzés vastagságú (4-6 mm), teljesen megszilárdult majd húzza a fésűt, hogy a perforáció alakja ép. Is lehet egy kis ragasztó megszilárdult elhelyezett 4 ℃ hűtőszekrény több mint 10 percet, annak érdekében, hogy felgyorsítsa a ragasztó megszilárdult. d. pipettázási ki a lyukakat, mielőtt a buborék, amikor a pecsételő pipetta függőlegesen, nem károsítja a gélt pórus falak, annak érdekében, hogy elkerüljék sávozás szabálytalan mintázat. e. Normális körülmények között nem kell mintát minden egyes pontja egy tipp, szívó elektroforézis puffert mosni többször is, majd pont a következő minta. Gél EB, ne érintse meg közvetlenül a műanyag, műanyag hulladék kell összpontosítaniuk, nem alom. |
| Használó Felülvizsgálati |
|
Nincs még hozzászólás |
