| Nyelv : |
|
| Enciklopédia közösség |Enciklopédia válaszok |Küldje el kérdését |Szókincs |Feltöltés ismeretek |
Fluoreszcens próba |
 |
|
Technology definíciók Kínai Név: Fluorescent szondák Angol neve: fluoreszcens próba Meghatározás: A fehérjék vagy más makromolekulák nem-kovalens kölcsönhatások elhagyó fluoreszcens tulajdonságait, egy vagy több kis molekula változás. Makromolekulák lehet használni, hogy tanulmányozza a természet és a viselkedést.Alkalmazott tudomány sejtbiológia (a tárgy), sejtbiológiai módszerek (két téma) A fenti tartalom a Nemzeti Tudományos és Technológiai Jóváhagyó Bizottság bejelentette, Egy fluoreszcens címkézés csoport létrehoz a gerjesztő fény hullámhossza a stimulált emisszió fényében, amikor egy másik csoport a megfelelő távolság pajzs, akkor az eredeti távadó fogják maszkolni, csoportok és abszorbeált fény átalakíthatjuk más hullámhosszú emittált fény vagy hő , az úgynevezett FRET. Alapvető információk UV - látható - közeli infravörös tartományban jellemző fluoreszcencia és fluoreszcencia tulajdonságait (gerjesztési és emissziós hullámhossz, intenzitás, élettartam, polarizáció, stb), változhat a természete a környezet, mint a polaritás, törésmutató, viszkozitás változás érzékenyen megváltozott egy osztály a fluoreszcens molekulák. A nukleinsav (DNS vagy RNS), fehérjék vagy más makromolekulák elhagyó, nem-kovalens kölcsönhatások egy vagy egy kis változás a fluoreszcencia tulajdonságai molekulák. Makromolekulák lehet használni, hogy tanulmányozza a természet és a viselkedést. fluoreszcens próba Fluoreszcencia rezonancia energia transzfer (FRET) Egy fluoreszcens címkézés csoport létrehoz a gerjesztő fény hullámhossza a stimulált emisszió fényében, amikor egy másik csoport a megfelelő távolság pajzs, akkor az eredeti távadó fogják maszkolni, csoportok és abszorbeált fény átalakíthatjuk más hullámhosszú emittált fény vagy hő , az úgynevezett FRET. Kémiai tulajdonságok Kvantitatív PCR használ fluoreszkáló kémiai hatóanyagok is két csoportba sorolhatjuk: fluoreszcens szondák és fluoreszcens festékekkel. Hozzáadása PCR amplifikációs primer pár, míg a hozzá adott fluoreszcens próba, a szonda egy oligonukleotid, egy jelentést végeket jelölt egy fluorofor kvencser-csoport. Probe ép, újságíró csoport fluoreszcencia által kibocsátott jelek kioltó felszívódását, PCR, Taq enzim 5'-3 'exonukleázaktivitása enzim lebomlását a szonda, hogy a jelentés és a kioltó fluorofórral elválasztó ki a fluoreszcens csoport, a fluoreszcencia ellenőrző rendszert úgy, hogy a fluoreszcens jelet is kapott, hogy van, mindegyik az egyik szál a DNS amplifikáció, van kialakítva, egy fluoreszcens molekula, a fluoreszcens jel elérése PCR-termék felhalmozódása és alkotnak egy teljes szinkronizálást. Real-time PCR technika azonosítására és a cél gén primer és próba tervezési elvek 1.. Target gének meghatározására: kiválasztása Detect közös gének felderítése érdekében, hogy elkerüljék a hamis negatívok (észrevétlenül). 2.. Detect töredékek meghatározása: Válassza észlelése konzervatív csoport (kevesebb mutáns) (hogy ne hamis negatív), a csoport-specifikus szekvencia (mutációk több) (ne álpozitív), mint primer próba tervezési helyzetbe. Fragment hosszúság 70 150bp. 3.. Primer: hossz 17-25bp, GC-tartalma 30-80%, izzítás hőmérséklete (Tm érték) 58-60 ℃, ne primer dimer stabilitását (különösen a több közös érzékelés) és a hajtű (szabad energia, mint a-3.5kc / m); szekvenciát is előfordulhat egymást követő g, 3 'végén, hogy elkerüljék a G vagy C, hogy elkerüljék, az utolsó öt bázisok két vagy több G vagy C. 4.. Szonda: hossza 20-30bp (Taqman) vagy 16-25bp (MGB) GC-tartalma 30-80%, Tm értékének 68-70 ℃, ne egy stabil dimer és hajtű szerkezet (szabad energia, mint a-3.5kc / m), 5 'végén nem lehet G, helyezze olyan közel az upstream primer, kiválasztott hullámhossz egészen más (több közös érzékelés), illetve Fam (egyetlen közös érzékelés) fluoreszkáló címkéket. Role cél A leggyakrabban használt fluoreszcens immunvizsgálat jelzett antigén vagy antitest, fel lehet használni a mikro-környezetekben, mint például a felületaktív anyag micellákat, kétrétegű membránok, fehérjék stb mikroszkopikus jellemzői az aktív pont a szonda. Általában megkövetelik szondák moláris elnyelési együttható, magas fluoreszcencia kvantum hozamok hosszabb hullámhossz és emissziós hullámhossz egy nagyobb Stokes eltolódás, elemzés immunizálás antigén vagy antitest kötő nem érinti a tevékenységét . Is fel lehet használni, hogy meghatároztuk a nukleotid fragmens jelölt és specificitással és mennyiségileg érzékeli a nukleinsav mennyiségének. Osztályozása és észlelése A leggyakrabban használt osztálya fluoreszkáló szondák fluoreszcein szondák, szervetlen ionok fluoreszkáló szondákat, fluoreszkáló kvantum pontok, molekuláris jelzők. Amellett, hogy a fluoreszcens próbák használt mennyiségi elemzésére nukleinsavak és fehérjék, de nukleinsav festés, DNS elektroforézis, nukleinsav-hibridizáció, kvantitatív PCR-rel, és a DNS-szekvenálás, mindkettő széles körben alkalmazható. Jelenleg a fluoreszcens próba kimutatását módszerek többnyire egyetlen ponton mérések és töltés-csatolt eszköz (CCD) fluoreszcens képalkotó (beleértve a mikro-analízis konfokális fluoreszcens mikroszkópia képalkotás). Mivel a pont fénysokszorozó pásztázási idő hosszabb, a lézer besugárzás intenzitása nagy, nehéz, hogy megragadják a korai változások fluoreszcenciát. A fluoreszcencia képalkotási terület array CCD nagy széles látómező képalkotás képalkotó idő állítható, így a felismerése a hatás jobb. Chemiluminescence felismerés a legnagyobb jellemzője az egyszerű eszközök, könnyű kezelhetőség, gyors elemzés és magas érzékenység. Chemiluminescence képalkotó vizsgálat (CLI) kemilumineszcens és képalkotó technológia, amely nagy felbontású, multi-minta egyidejű érzékelés, spektrális érzékenységi tartomány és magas érzékenység [10,11], már széles körben használják a gélek, fehérje impresszum és microarray chip kemilumineszcenciás jel észlelése. A kísérletet létre TCPO? Imidazole? H2O2? Fluoreszkáló szondák kemilumineszcenciát képalkotó rendszer. Mivel a kémiai lumineszcencia nem igényel semmilyen fényforrás, amely a fluoreszcens próba kimutatására képalkotó kemilumineszcencia, fluoreszcencia kimutatására, vagy ha elkerülhetetlen, ha fluoreszcens leképező optikai háttér interferenciát, amely az alacsonyabb kimutatási határ érhető el. Ezzel a rendszerrel, ötféle fluoreszcens próbák mennyiségi elemzés és tanulmány a tetrametil-rodamin-izotiocianát (TRITC)-jelölt monoklonális anti-humán IgG-t kecske kemilumineszcenciás képalkotás, a kimutatási határ 10-11mol / L, azonos feltételek mellett, mint a kimutatási határ fluoreszcencia képalkotás egy nagyságrenddel. |
| Használó Felülvizsgálati |
|
Nincs még hozzászólás |
