Nyelv :
SWEWE Tag :Bejelentkezés |Bejegyzés
Keresés
Enciklopédia közösség |Enciklopédia válaszok |Küldje el kérdését |Szókincs |Feltöltés ismeretek
Előző 1 Következő Válassza ki a Pages

Fizikai térkép

Technology definíciók

Kínai neve: Fizikai térkép

Angol neve: fizikai térkép

Definíció: DNS molekuláris szintű leírása gének vagy a gének és a kapcsolat a DNS-fragmentum mintákat.Alkalmazott tudomány: halászati ​​tudomány (a tárgy), vízi tenyésztés (két téma)

A fenti tartalom a Nemzeti Tudományos és Technológiai Jóváhagyó Bizottság bejelentette,

Fizikai térkép a használata restrikciós endonukleáz a kromoszómába fragmentum átfedő szekvenciák alapján meghatározott sorrendben fragmentumok közötti kapcsolat, valamint a fizikai távolság közötti genetikai markerei bázispár (bp) vagy kilobázis (kb), illetve megabázis ( mb) a térkép. A fizikai térkép a humán genom, például, hogy tartalmaz két jelentése van, az egyik kap eloszlik a genom szekvencia 30000 zászló pontok (STS, amely azt határozza meg és a rendelkezésre álló helyre jellemző kromoszómális amplifikáció PCR egyetlen példányát a szekvencia).

Rövid bevezetés

Fizikai térkép (Fizika Térkép): fizikai térképe DNS ábrázolt helyzetét marker lehet azonosítani, és a távolságot egymás között (a bázispár olyan intézkedés, az egységek számát), amely azonosítható markerek közé restrikciós emésztés locus gének. Fizikai térkép nem veszi figyelembe a valószínűsége két genetikai markerek és egyéb információkat egymással. Az emberi genom, a fizikai térkép legvastagabb csík kromoszóma festési minta, a finom minta, hogy megmérjék a teljes nukleotid-szekvenciáját a DNS-t.

Cél

Gene A kapott cDNS-klónokat szekvenáljuk mindkét végén a cDNS-szekvencia körülbelül 200bp, a primereket terveztünk és szintetizáltunk, megfelelőleg, a cDNS és genomi DNS-t templátként amplifikáltuk; hasonlítson és tisztított adott sávban; radioaktív próbát állítunk elő az STS genomi in situ hibridizáció, van egy jel, hogy minden 100kB a második épül alapján a nagy töredék, amely az egyes kromoszóma: az első az, hogy létrejöjjön több száz kb YAC (élesztő mesterséges kromoszóma) ábrázolja a YAC, kapott folyamatos átfedő YAC klónok, az úgynevezett kis pontosságú fizikai feltérképezése, és több tucat szinten kb DNS-fragmens a YAC véletlenszerűen vágva koz úgynevezett precíziós térképészeti fizikai feltérképezése.

Vonás

Mivel a restrikciós endonukleáz a DNS-ben vágni lánc specifikus szekvenciák alapul, nukleotid szekvenciáját különböző DNS, emésztés után jön létre, miután a DNS-fragmentumokat a különböző hosszúságú, és így képeznek egyedi restrikciós térképet . Ezért, a DNS egy fizikai térkép a jellemzői a molekuláris DNS szerkezetét. DNS egy nagy molekula, által termelt enzim restrikciós fragmentumokat DNS szekvenciáló reakciók esetében csak rendkívül kis töredéke ezeknek a DNS-fragmentumok közötti helyzetben a lánc először oldja meg a problémát, ez egy fizikai térkép a DNS-szekvencia meghatározása az alapítvány is lehet értelmezni, mint a tervezet irányító DNS-szekvenálás. Általánosságban elmondható, hogy a DNS-szekvenálás fizikai térkép termelés kezdődik, ez az első lépés a szekvenálás. DNS fizikai térkép készítése Számos módja van, itt, hogy válasszon ki egy egyszerű, közös módszert ─ ─ jelzett fragmenseket a részlegesen emésztett módszer illusztrálására elveinek térkép teszi.

Lépés

Meghatározása DNS részlegesen emésztjük a fizikai térkép két alapvető lépésből áll:

(A) teljes lebomlása: válassza ki a megfelelő restrikciós endonukleázzal DNS szálat a vizsgálandó (már jelölve radioizotóp-on) teljesen lebomlik, a bomlástermékeket elválasztva gél elektroforézissel autoradiográfia után, a kapott spektrum áll DNS-szál A számát és méretét töredékek.

(2) a részleges lebomlás: a végén-jelzett DNS-t, az egyik szál a kísérleti szalag nyomjelző izotóp, enzim-, majd használja ugyanazt a részleges bomlás a DNS-lánc, azaz szabályozásával a reakció feltételeit úgy, hogy az enzim kivágja a DNS-lánc véletlenszerű törés, és a Kerüljön minden seb teljesen leromlott törés következik be. Részleges hidrolizált azonos elektroforetikus elválasztás és autoradiográfiás. Összehasonlítva a két lépésből álló autoradiográfia térképen alapuló fragmens mérete és a különbségek az egyes más restrikciós fragmentumokat lehet kirakni a helyét a DNS-lánc. Itt a meghatározása a fizikai térkép a hiszton-DNS és részletes leírást.

Gyárt

Ez a gén 5900bp, HpaI restrikciós enzimmel Ⅱ teljes lebomlása a DNS-fragmentumok termel öt méretben, elektroforetikus elválasztása és referencia szabványoknak ismert molekulatömegű DNS-sávot, hogy a méret az ilyen fragmenseket 1930,1690,1020, 950 és 310 bp. Nehéz kitalálni a DNS négy Hpa Ⅱ seb, de a metszés helyét és öt töredék a teljes genom szekvencia a divat, nem tudom. Ezután, a végén jelzett DNS-fragmenseket a részleges lebomlását HpaI Ⅱ, mivel minden egyes véletlenszerűen vágott szünet, a szilánkok száma által termelt teljes degradációs termékek pontosabban. Azonban, miután elektroforézis, autoradiográfia csak jelenik meg a térképen jelzett DNS-végén töredékek. Ami a DNS-t tesztelt a jelet a bal oldalon, majd a táblázat megmutatja 4210,3260,2950 autoradiográfiás és 1020bp négy sáv. A legkisebb fragmens (1020bp) és a teljes degradációs termékek az azonos fragmens, úgy kell elhelyezni a bal végén a gén, míg a legnagyobb fragmenst (4210bp), valamint a teljes genom (5900bp) töredék a különbséget (1690bp) kétségtelenül kell elhelyezni jobb végén a gén ; A fennmaradó három fragmenst (310 bp és 1930,930) szomszédságában helyezkedik el részlegesen emésztett fragmentumokat szerint a különbség nagyon könnyű meghatározni. Következtetni, hogy az öt darabjai a gén a rend (bal → jobb): 1020 -1930-310-950 - 1690. Fizikai térképezés és DNS-szekvenálása A meglehetősen hasonló elv, egyrészt a fragment hossza a feltételezés állásban van, a különbség, hogy meghatározzák a szekvenált nukleotid (bázis) helyzetben, és ebben az esetben az, hogy meghatározza a helyét a klip. Meghatározása DNS fizikai térkép lehetne végezni minden fragmens nukleotid szekvencia analízissel. Minden a töredékek a DNS szekvencia meghatározását, mind a töredékek a fizikai térkép "patchwork" összeállítani az összes vizsgálati nukleotid szekvenciája a DNS-láncban. Gene szekvenálás, amit mindannyian szeretnénk elérni a célját, általában a hossza az emberi genom több mint 10KB, jó géneket lehet akár 200KB, hogy a teljes gén szekvenálás, hogy a sok munka. Ezek a feladatok is igénybe vehet számos különböző módon, de az alapvető ötlet ugyanaz, azaz, a meghatározó alapján a fizikai térképet, majd DNS-szekvenálással.


Előző 1 Következő Válassza ki a Pages
Használó Felülvizsgálati
Nincs még hozzászólás
Én is kommentálom [Látogató (35.173.*.*) | Bejelentkezés ]

Nyelv :
| Ellenőrző kód :


Keresés

版权申明 | 隐私权政策 | Szerzői jog @2018 A világ enciklopédikus tudás